Njihov napredak u umjetnosti DNK otisaka prstiju znači da im sada trebaju samo relativno mali uzorci - obično 100 - 200 ml - kako bi provjerili je li djevičansko maslinovo ulje doista zaštićene sorte i podrijetla.

I za razliku od kemijskih i senzornih testova - čiji rezultati najviše mogu ukazati na to da je ulje prerezano drugim biljnim uljem - pronalazak DNK, recimo ulja lješnjaka ili suncokreta u maslinovom ulju, nedvosmislen je dokaz njegove prisutnosti, kažu.

Doktor Juan de Dios Alché, vodeći istraživač na projektu Španjolskog nacionalnog istraživačkog vijeća (CSIC), rekao je zaOlive Oil Times ima još puno posla, ali nada se da će u roku od šest mjeseci test biti komercijalno dostupan.

"Već smo imali dosta kontakata s ljudima iz prehrambenog sektora, uključujući Sjedinjene Države, i vjerujemo da za to postoji velika potražnja ”, rekao je.

Alché, iz CSIC - ovog odjela za biokemiju, staničnu i molekularnu biologiju biljaka, dioEstación Experimental del Zaidín institut u Granadi, također je objasnio da će u velikoj mjeri dopuniti, ali ne i zamijeniti druge verifikacijske testove.

Olive Oil Times: Koje su prednosti ovog testa?

Dr. Juan de Dios Alché: Djevičansko maslinovo ulje relativno je skupo i ljudi su spremni platiti više za osobine koje cijene, poput ulja iz određene regije ili sorte, što nešto što nepošteni proizvođači koriste. Ovim testom možemo provjeriti autentičnost maslinovog ulja koja potvrđuje je li doista podrijetla i sorte ili sorti, navedeno na etiketi.

P: Koja su njegova ograničenja?

O: Ovo nije test koji će odrediti stupanj maslinovog ulja. Također, zahtijeva otkrivanje netaknute DNK, što je često teško pronaći u rafiniranom ulju. jedan je od razloga zašto je dizajniran za djevičansko maslinovo ulje i na njega treba gledati kao na nadopunu drugim testovima, a ne kao zamjenu.

Također, u nekim slučajevima nismo u mogućnosti pozitivno analizirati uzorke jer imaju vrlo, vrlo male količine DNA ili zato što je DNA razgrađena.U takvim slučajevima moramo koristiti veće uzorke, ponekad do 1 litre. Korištenje visokih temperatura tijekom mljevenja jedan je od načina na koji se DNK razgrađuje.

P: Kako ste došli do razvijanja testa?

O: Kao dio našeg istraživanja peludi razvili smo veliku bazu fragmenata DNA uzetih iz lišća više od 90 različitih sorti maslina, uglavnom iz Španjolske, Portugala i Tunisa, ali također s najčešćim sortama iz Italije, Grčke, Francuske, Maroka i Libanona.

Jedna od njegovih primjena je certificiranje sorte masline iz cjepiva protiv alergija na pelud masline, no pokušali smo i utvrdili da je možemo koristiti i za identifikaciju maslinovog ulja, iako u Španjolskoj cijelo voće masline, uključujući sjeme, drobi se da bi se napravilo ulje i ne znamo točno odakle dolazi DNK koji u njemu nalazimo.

Oglas

P: Vaša se baza podataka temelji na DNK iz lišća masline, no znanstvenici su izvijestili da pronalazak DNK u lišću masline ne podudara se s onom ulja ulja.

O. Otkrili smo da se u velikoj većini slučajeva podudaraju.

P. Kako funkcionira test?

O: Temelji se na upotrebi mikrosatelita (poznatih i kao SSR - Simple Sequence Repeats) kao molekularnih markera. Izdvajamo DNA i koristimo ono što je poznat kao lančana reakcija polimeraze (PCR) za pojačavanje ovih SSR sekvenci. Zatim provjeravamo njihovu veličinu sekvenciranjem i usporedbom veličina s onim što je već u našoj bazi podataka.

Čini se da drugi molekularni biljezi sada daju čak i veću rezoluciju otiska prsta od SSR-a, ali mi i dalje koristimo mikrosatelite jer na njima već postoji mnogo baza podataka, poput naše, lako ih je protumačiti i reproducirati, i oni imaju visoku diskriminacijsku moć.

P: Traje li ispitivanje dugo i je li komplicirana prethodna obrada uzorka?

O: Trenutno je potrebno 7 - 10 dana, uključujući analizu. DNK ekstrahiramo pomoću centrifuge, otapala i komercijalnih pribora koje smo prilagodili, a za ispitivanje koristimo specijaliziranu laboratorijsku opremu, posebno PCR termocikler i kapilarni sekvencer. Neophodna prethodna obrada uzorka nije komplicirano, relativno rečeno.

P: Koji ste napredak postigli u posljednje dvije godine?

Osim proširenja baze podataka, optimizirali smo postupak ekstrakcije DNA iz uzoraka ulja. Koristimo različite metode za ekstrakciju DNA, od kojih su neke komercijalno dostupne, ali koje smo mi prilagodili, a također smo optimizirali postupak pojačanja.

P. Bi li ovaj test bio dovoljno isplativ da bi se mogao široko koristiti?

O. Cijena još nije određena jer našu metodu ne koristimo komercijalno, ali otkrili smo da za njom postoji potražnja iz prehrambenog sektora i moguće je da će se oko šest mjeseci moći ćemo ga ponuditi kao uslugu i da, bilo bi povoljno. Mali uzorak može provjeriti veliku seriju ulja.

P: Na čemu sada radiš?

Test traje dugo pa ga pokušavamo smanjiti. Također planiramo testirati širi spektar maslinovog ulja.

Nadalje, iako smo u maslinovom ulju uspjeli otkriti DNA iz ulja lješnjaka i suncokreta, do sada možemo samo potvrditi prisutnost stranih ulja, ne možemo kvantificirati udio, tako da je to nešto na čemu također radimo.

Daljnje čitanje o molekularnim markerima i provjera autentičnosti maslinovog ulja:

- Sljedivost maslinovog ulja, maslinova klica - obrada maslina, stolna maslina i industrija maslinovog ulja u Italiji, Dr. Innocenzo Muzzalupo (ur.)

- Pregled autentifikacije maslinovog drveta i ulja

- Život u 70-ima - Otkrivanje zamjenjivanja ulja sjemenkama, Richard Gawel

Izvori:

Tehnika razvijena za otkrivanje potencijalnih prijevara s maslinovim uljem. (Priopćenje na španjolskom jeziku eksperimentalne stanice Zaidín španjolskog nacionalnog vijeća za istraživanje.)
Borba protiv prijevara s hranom pomoću znanosti, Chemistry World
Identifikacija maslina postaje brza i laka, Olive Oil Times